被固(gu)定(ding)在基質(zhi)上的(de)(de)(de)分子(zi)稱(cheng)(cheng)為配體(ti)(ti)，配體(ti)(ti)和(he)基質(zhi)是共價結合的(de)(de)(de)，構成親和(he)層析(xi)的(de)(de)(de)固(gu)定(ding)相，稱(cheng)(cheng)為親和(he)吸(xi)附劑。親和(he)層析(xi)時首先選擇與待分離的(de)(de)(de)生物大分子(zi)有親和(he)力物質(zhi)作為配體(ti)(ti)，并將配體(ti)(ti)共價結合在適當的(de)(de)(de)不溶性基質(zhi)上。

將制備的親和(he)(he)吸附(fu)劑裝柱(zhu)平衡，當(dang)樣(yang)品(pin)溶液(ye)通過親和(he)(he)層(ceng)析柱(zhu)的時候，待(dai)分(fen)離(li)的生(sheng)物分(fen)子(zi)就與(yu)配(pei)(pei)體(ti)發(fa)生(sheng)特異性的結合，從而(er)留在(zai)固定相上；而(er)其它(ta)雜質不能與(yu)配(pei)(pei)體(ti)結合，仍在(zai)流動相中，并隨洗脫(tuo)液(ye)流出，這樣(yang)層(ceng)析柱(zhu)中就只(zhi)有待(dai)分(fen)離(li)的生(sheng)物分(fen)子(zi)。通過適當(dang)的洗脫(tuo)液(ye)將其從配(pei)(pei)體(ti)上洗脫(tuo)下來，就得到了純化的待(dai)分(fen)離(li)物質。